產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
細(xì)胞名稱 結(jié)直腸癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞；T84
形態(tài)特性: 上皮樣；多角
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 表達(dá)神經(jīng)遞質(zhì)受體和肽類激素受體。
培養(yǎng)條件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代；3-4天一次
傳代情況: PN
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產(chǎn)品名稱 | 結(jié)直腸癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞；T84 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63867 |
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實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
T細(xì)胞抑制因子檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 犬腎細(xì)胞-HA；MDCK-HA形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣B7H4
嵌合蛋白2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人成骨肉瘤細(xì)胞；well5形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Chimerin 2
SARS病IgM抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 豬小腸上皮細(xì)胞；ZYM-DIEC02形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣SARS-CoV IgM antibody
細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)因子檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞；Psp-EFGP-Iprl形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Apoptosis regulator BAX
吡咯啉-5-羧合成酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人骨肉瘤細(xì)胞；SF-86形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣pyrroline-5-carboxylate synthetase
3-磷肌醇依賴性蛋白激酶1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞；pCSN2-HLZ形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Phosphoinositide Dependent Protein Kinase 1
肝片吸蟲抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人成骨肉瘤細(xì)胞；well2形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Fasciola hepatica antibody
空腸彎曲菌IgM抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人源胰腺癌細(xì)胞；PAXC-003形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Campylobacter Jejuni IgM antibody
α1微球蛋白；bikunin蛋白前體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人成骨肉瘤細(xì)胞；LZJ形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣alpha-1-microglobulin；bikunin precursor
可溶性CD200檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞；4.00E+10形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣soluble CD200
蛋白DJ1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞；GPC3-7C8形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣DJ-1 protein
神經(jīng)絲蛋白M檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞；1-PreS1（1-E6）形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Neurofilament M
空腸彎曲菌IgA抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人源胰腺癌細(xì)胞；PAXC-002形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Campylobacter Jejuni IgA antibody
空腸彎曲菌IgG抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；AFB20084F3形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Campylobacter Jejuni IgG antibody
轉(zhuǎn)化生長因子β受體3檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞；5-PeS1(2-D8)形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Transforming growth factor beta receptor type 3
補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；AFB200810G4形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Complement factor H-related protein 2
維生素k依賴蛋白s檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；AFG20102G6形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Vitamin K-dependent protein S
結(jié)直腸癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞；T84路路通4481-62-3英文名：Liquidambaric acid
英文別名：Betulinonic acid
CAS登錄號：4481-62-3
分子式：C30H46O3
分子量：454.69
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：白色粉末狀晶體
規(guī)格：20 mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源：金縷梅科植物楓香樹Liquidambar formosana Hance
溶解性：可溶于性溶劑。
熔點(diǎn)：244～246℃
旋光度：+31.5°()
藥理藥效：抗炎鎮(zhèn)痛作用。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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