公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
胰腺細(xì)胞系;HPC-Y5 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63689 |
細(xì)胞名稱 胰腺細(xì)胞系;HPC-Y5
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C8
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Vindorosine
CAS No.:5231-60-7
中文名:
分子式:C24H30N2O5
羅漢果皂苷IVe 訂購(gòu)|咨詢 氧鯊環(huán)酶(OSC) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg/支
5羥基糠醛 訂購(gòu)|咨詢 δ合酶1(ALAS1) 規(guī)格: HPLC≥95%,20mg/支
刺五加甙E;刺五加苷E 訂購(gòu)|咨詢 δ脫水酶(ALAD) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
環(huán)氧澤瀉 訂購(gòu)|咨詢 δ脫水酶(ALAD) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
人參皂苷Re 訂購(gòu)|咨詢 基轉(zhuǎn)移酶(AMT) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
大黃 對(duì)照品 訂購(gòu)|咨詢 肽酶O(APO) 規(guī)格: 20mg;100.0%
芬唑 對(duì)照品 訂購(gòu)|咨詢 基二轉(zhuǎn)酶(AADAT) 規(guī)格: 100mg;100.0%
對(duì)照品 訂購(gòu)|咨詢 基己糖苷酶Aα(HEXα) 規(guī)格: 200mg;99.5%
抗?fàn)钕偾虻鞍卓贵w 訂購(gòu)|咨詢 基己糖苷酶Aα(HEXα) 規(guī)格: 4000IU/支
竹節(jié)香附素A;Raddeanin(Ane 訂購(gòu)|咨詢 基己糖苷酶Bβ(HEXβ) 規(guī)格: 20mg
;LNicotine 訂購(gòu)|咨詢 基己糖苷酶Bβ(HEXβ) 規(guī)格: 20mg
蝙蝠葛蘇林;Odiacetyld 訂購(gòu)|咨詢 基己糖苷酶Bβ(HEXβ) 規(guī)格: 10mg
黃柏;Phellodendrine 訂購(gòu)|咨詢 基酰酶1(ACY1) 規(guī)格: 20mg
羽扇豆;Lupeol 訂購(gòu)|咨詢 基酰酶2(ACY2) 規(guī)格: 20mg
小檗紅酯; 訂購(gòu)|咨詢 基端前心肽(NTProANP) 規(guī)格: 20mg
仙鶴草B;agrimol B 訂購(gòu)|咨詢 基端前心肽(NTProANP) 規(guī)格: 20mg
文多靈;Vindoline 訂購(gòu)|咨詢 基端前心肽(NTProANP) 規(guī)格: 20mg
蛇床;Lupulon 訂購(gòu)|咨詢 基端前腦素(NTProBNP) 規(guī)格: 20mg
CLUAP1 成簇相關(guān)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Methazolamide
CTAG1B/Cancer/testis antigen 1B 腫瘤/抗原1B 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ziprasidone
CTAG2 腫瘤/抗原2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Seratrodast
CTAGE5 皮膚T細(xì)胞淋巴瘤相關(guān)抗原5抗體(腦膜瘤表達(dá)抗原6) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Metolazone
AGPAT1 溶血脂?;D(zhuǎn)移酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Metolazone
EBAG9/RCAS1 腫瘤相關(guān)表面抗原RCAS1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Cediranib Maleate
FAM120C 構(gòu)成激活過(guò)氧酶活增生受體γ樣蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sitagliptin
MUM1/FLJ14868 突變的黑色素瘤相關(guān)抗原1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Vildagliptin
十八鎂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Magnesiumstearate 含量:CP,40%
十八 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Sodiumstearate 含量:IPC,98%
十八鉛 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Lead(II)stearate 含量:2N,0.01×100mm
十八酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Ethylstearate 含量:LR,95%
十八碳,12二 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Linoleicacid 含量:USP級(jí),99%
十八碳鉀 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Potassiumoleate 含量:BR,95%
十八二 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Subericacid 含量:BR
十八 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Sodiumoleate 含量:超純,99%
十八酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Ethyloleate 含量:AR,99%
十二鉬 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Phosphomolybdicacidhydrate 含量:GR,98%
胰腺細(xì)胞系;HPC-Y5營(yíng)養(yǎng)瓊脂規(guī)格:BR250g詳情介紹
ATCC培養(yǎng)基:2693改良Dixon(mDixon)規(guī)格:250g用途:用于真菌培養(yǎng)
可溶性焦磷鐵規(guī)格:0.025g/支*5用途:每支添加于100ml HB8493或100ml HB8493-1中
TCBS瓊脂平板(9cm)規(guī)格:10個(gè)/包用途:用于致病性弧菌的選擇性分離
多價(jià)蛋白胨規(guī)格:250g用途:培養(yǎng)基原材料,提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)因子
皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)規(guī)格:250g用途:加入牛肉粒,用于肉梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。