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產(chǎn)品名稱 | 胚肺轉(zhuǎn)化細胞；SL-1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63709 |
細胞名稱 胚肺轉(zhuǎn)化細胞；SL-1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
Vasicine
CAS No.：6159-55-3
中文名：鴨嘴花
分子式：C11H12N2O
;Artemisinic acid 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格： 20mg
秋水仙;Colchicine 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格： 20mg
?；?/font>;Taurine 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格： 20mg
毛兩面針素;toddalolactone 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14) 規(guī)格： 20mg
素;Tripdiolide 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14) 規(guī)格： 20mg
羅丹明B;Rhodamine B 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15) 規(guī)格： 20mg
款冬;Tussilagone 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15) 規(guī)格： 20mg
N基野靛;Caulophyllin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15) 規(guī)格： 20mg
華基;Cibufagin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶16(MMP16) 規(guī)格： 20mg
虎杖苷;Polydatin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶16(MMP16) 規(guī)格： 20mg
L谷;LGlutamic aci 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶17(MMP17) 規(guī)格： 100mg
扶桑甾;betarosasterol 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶19(MMP19) 規(guī)格： 10mg
大豆異黃 ;Isoflavone 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶19(MMP19) 規(guī)格： 20mg
對羥基桂;pHydroxycin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2) 規(guī)格： 20mg
草;Oxalic acid 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2) 規(guī)格： 100mg
草質(zhì)素;Herbacetin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2) 規(guī)格： 20mg
八氫姜黃素;octahydrocurcu 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2) 規(guī)格： 20mg
百蕊草素I;Kaempeerol3O 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2) 規(guī)格： 20mg
EphB1/Eph receptor B1 酪蛋白激酶受體B1抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Lercanidipine HCl
phosphoEphB1/Eph receptor B1(Tyr317) 酪蛋白激酶受體B1抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml Lercanidipine HCl
phosphoEphB1/Eph receptor B1(Tyr331) 酪蛋白激酶受體B1抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml Promethazine Hydrochloride
Kidins220 220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Agomelatine
phosphoKidins220 (Ser918) 220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml Agomelatine
ELF1/E74 like factor 1 轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Piracetam
Ephrin B3 酪蛋白激酶B3抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Ramelteon
EphB1+EphB2 酪蛋白激酶受體B1+B2抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Lacosamide
戊五 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Xylitol 含量:高純，98%
芴甲 進口、國產(chǎn) 英文名稱:9Fluorenylmethanol 含量:AR，98%
芴甲羰基D脯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:FmocDProOH 含量:特純，99%
芴甲羰基D纈 進口、國產(chǎn) 英文名稱:FmocDValOH 含量:特純，99%
芴甲羰基L谷5叔丁酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:FmocGlu(OtBu)OH 含量:BR，98%
芴甲羰基L纈 進口、國產(chǎn) 英文名稱:FmocLvaline 含量:BR，99%
芴,亞聯(lián)基甲 進口、國產(chǎn) 英文名稱:9Fluorenone 含量:BR，98%
西黃蓍膠粉 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Gumtragacanthpowder 含量:GR，99.5%
進口、國產(chǎn) 英文名稱:Rapamycin 含量:BR，85%
西瑪嗪 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Simazine 含量:高純，100mM
胚肺轉(zhuǎn)化細胞；SL-1固體培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于細菌、纖維分解菌、真菌計數(shù)培養(yǎng)
四硫磺鹽煌綠增菌液基礎（TTB）顆粒規(guī)格：250g用途：用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
MS培養(yǎng)基（含瓊脂，不含蔗糖）規(guī)格：250g用途：用于植物組織培養(yǎng)的基礎培養(yǎng)基
葡萄糖（腦膜炎奈瑟氏菌）規(guī)格：20ml/支詳情介紹
GN增菌液（10ml）規(guī)格：10ml*20用途：主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng)，亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)（GB標準）
酪蛋白胨大豆吐溫20培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于藥品（含防腐劑）的中和劑
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