細胞名稱 結直腸腺癌細胞;SW480[SW-480]
形態(tài)特性: 上皮細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: SW480源自原位直腸腺癌。SW620ATCCCCL-227源自同一病人一年后的淋巴結轉移。CSAp和直腸抗體3陰性。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。p53基因第273位密碼子的G->A突變引起Arg->His替代,309位密碼子的C->T突變導致Pro->Ser替代。細胞p53蛋白表達水平提高。癌基因c-myc,K-ras,H-ras,N-ras,myb,sis和fos的表達呈陽性。癌基因N-myc的表達未做檢測。不表達細胞溶解酶,一種與腫瘤入侵相關的金屬蛋白。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況: P(99+5)
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產品名稱 | 結直腸腺癌細胞;SW480[SW-480] |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63920 |
產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
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細胞色素B還原酶1檢測試劑盒細胞名稱: 綠色熒光蛋白標記的小鼠癌細胞;Ca761-EGFP形態(tài)特性: 上皮樣Cytochromebreductase1
可溶性白細胞分化抗原40配體檢測試劑盒
SNX9(Sorting nexin-9) ELISA Kit
雜交瘤;G2C51A2注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用5-羥基-2-金剛烷酮Human TFE3 ELISA Kit
人Eppin蛋白單克隆抗體雜交瘤;2F2F7拉丁屬名: Grifola frondosa6-氯-1-己Human TFEB ELISA Kit
雜交瘤;rBinlb10A5拉丁屬名: Hymenobacter soli6-氯-1-己Human TFEC ELISA Kit
小鼠腦膜;GIBH001拉丁屬名: Mucor racemosus2-溴-4'-基苯乙酮Human TFIP11 ELISA Kit
小鼠雜交瘤;2F10注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用2-溴-4'-基苯乙酮Human TFPT ELISA Kit
雜交瘤;S-71-9拉丁屬名: Hymenobacter metalli2-氨基-4-苯基噻唑Human TFE3 ELISA Kit
雜交瘤;S-66-5用途: 害蟲生物防治2-氨基-4-苯基噻唑Human TFEC ELISA Kit
雜交瘤;1B8拉丁屬名: Chaetomium bostrychodesDeferasiroxHuman TFEB ELISA Kit
雜交瘤;A3C注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用辛酸-1-13CHuman TGDS ELISA Kit
雜交瘤;SCRV-G-1B2用途: 害蟲生物防治十四Human TFIP11 ELISA Kit
雜交瘤;IIC4拉丁屬名: Penicillium nepalense十四Human TFPT ELISA Kit
雜交瘤;WL-3C2用途: 研究十四Human HDAC7(Histone deacetylase 7) ELISA Kit
單抗;THC10A拉丁屬名: Bacillus subtilis癸Human TGFBR3(Transforming growth factor beta receptor 3) ELISA Kit
單抗;Met-1拉丁屬名: Aspergillus tubingensis癸Human TEX38 ELISA Kit
雜交瘤;20-G8拉丁屬名: Flavobacterium tiangeerense3,5-二叔丁基-4-羥基苯基酸Human TFAM(TFAM) ELISA Kit
雜交瘤;DF4拉丁屬名: Escherichia coli3,5-二叔丁基-4-羥基苯基酸Human TFE3 ELISA Kit
雜交瘤;1D12-B5拉丁屬名: Halomicrobium mukohataei聯酸新戊二酯Human TEX12 ELISA Kit
雜交瘤;18A4拉丁屬名: Streptomyces
體P2Y11檢測試劑盒細胞名稱: 紅色熒光蛋白標記的小鼠小膠質細胞;BV2-tdT形態(tài)特性: 多形型Purinergic Receptor P2Y, G Protein Coupled 11
結直腸腺癌細胞;SW480[SW-480]綿馬貫眾素ABBA12777-70-7中文別名:東北貫眾素
英文名:Dryocrassin ABBA
CAS登錄號:12777-70-7
分子式:C43H48O16
分子量:820.29
分子結構:
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:鱗毛蕨科植物粗莖鱗毛蕨的干燥根莖及葉柄殘基提出的有效成分
藥理藥效:有小,有驅蟲、止血、清熱解的功效。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年