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產(chǎn)品名稱 | 胚胎心肌組織來源細(xì)胞；CCC-HEH-2 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63402 |
細(xì)胞名稱 胚胎心肌組織來源細(xì)胞；CCC-HEH-2
形態(tài)特性:
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 取材自引產(chǎn)的11周男性胚胎組織，該細(xì)胞由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%FBS
傳代方法: 1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法（-）
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
雜交瘤細(xì)胞株；4G6形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-ANGPTL4 Polyclonal Antibody
大鼠骨髓源神經(jīng)嵴祖細(xì)胞；N1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-PRPF8 Polyclonal Antibody
雜交瘤細(xì)胞株；6B5.2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-YAP1 Polyclonal Antibody
雜交瘤細(xì)胞株；Jnw1D2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-POLR3F Polyclonal Antibody
雜交瘤細(xì)胞株；Jnw1B7形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-SMARCA4 Monoclonal Antibody
雜交瘤細(xì)胞株；Jnw1D4形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-ICAM1 Monoclonal Antibody
雜交瘤細(xì)胞株；HR0247-6形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-PRSS1 Polyclonal Antibody
雜交瘤細(xì)胞株；2F8形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-HSPD1 Monoclonal Antibody
雜交瘤細(xì)胞株；7D3F11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-IKBKB Monoclonal Antibody
雜交瘤細(xì)胞株；2C11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-DRD3 Polyclonal Antibody
小鼠皮膚黑色素瘤-紅色標(biāo)記注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用4-叔丁基苯硫酚Human RAP1B(Ras-related protein Rap-1b) ELISA Kit
小鼠癌-熒光素酶標(biāo)記注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用4,7,13,16,21,24-六氧-1,10-二氮雙環(huán)[8.8.8]二十六烷Human RAP2A ELISA Kit
人皮膚黑色素瘤熒光標(biāo)記拉丁屬名: Lactobacillus rhamnosus4,7,13,16,21,24-六氧-1,10-二氮雙環(huán)[8.8.8]二十六烷Human RAP1GAP ELISA Kit
人卵巢癌-熒光素酶標(biāo)記拉丁屬名: Monascus ruber間溴苯甲Human RBM16 ELISA Kit
人腎腺癌-熒光素酶標(biāo)記拉丁屬名: Salinibacterium amurskyense間溴苯甲Human RAPGEF5 ELISA Kit
人內(nèi)膜癌-熒光素酶標(biāo)記拉丁屬名: Alcanivorax dieselolei間溴苯甲Human RAPH1 ELISA Kit
人慢性髓原白血病-熒光素酶標(biāo)記拉丁屬名: Geomyces sp.二苯并噻吩-4-甲Human RAPGEFL1 ELISA Kit
小鼠肺癌-熒光素酶標(biāo)記拉丁屬名: Streptomyces lavendularectus二苯并噻吩-4-甲Human RAPSN ELISA Kit
人胃癌-熒光素酶標(biāo)記拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. spizizenii烯酸四酯Human RAMP3 ELISA Kit
人胰腺癌-熒光素酶標(biāo)記拉丁屬名: Trichoderma sp.烯酸四酯Human ABCC6(Multidrug resistance-associated protein 6) ELISA Kit
人Burkitt's淋巴瘤-熒光素酶標(biāo)記拉丁屬名: Arthrobacter parietis1, 2-二氯-3-代苯Human RANBP10 ELISA Kit
人結(jié)腸
胚胎心肌組織來源細(xì)胞；CCC-HEH-2兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒HumanPeptideYYELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒HumanpodocinELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒HumanponticulinELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒HumanPrednisoloneELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒HumanpreptinELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒HumanProtamineELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒HumanProteinCELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
兔子血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒HumanProteinSELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
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