產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
幼蟲芽孢桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Paenibacillus larvae | EY00P9212 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
廣藿香酮(標準品)(標準品)Human LPP ELISA Kit
(標準品)驅(qū)蟲斑鳩菊(標準品)Human LPIN2 ELISA Kit
(標準品)Human LPPR2 ELISA Kit
去甲斑蝥酸(標準品)Human LPXN ELISA Kit
去甲斑蝥酸鈉(標準品)Human LRAT ELISA Kit
去甲堿鹽酸鹽(標準品)Human LPIN2 ELISA Kit
旱蓮苷A去甲氧基姜黃素Human LRCH1 ELISA Kit
去甲氧基姜黃素(標準品)Human LPPR2 ELISA Kit
去甲氧基麻醉椒素Human LPP ELISA Kit
(標準品)去甲異波爾定(標準品)Human LMNB2 ELISA Kit
冬蟲夏草去甲澤拉木(標準品)Human LPXN ELISA Kit
17-戊酸酯,戊酸去芹菜糖桔梗皂苷D(標準品)Human LMF2 ELISA Kit
17-戊酸酯,戊酸去芹糖桔梗皂苷D3Human LRAT ELISA Kit
戊酸(標準品)去氫厄弗酚Human LRCH1 ELISA Kit
,酸去氫二異(標準品)Human LIN7A ELISA Kit
幼蟲芽孢桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒突觸蛋白2(SYNPO2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)磷酸酶抑制劑復合物 II 10x 質(zhì)量規(guī)格:>95%,進分
角膜蛋白(KERA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)過硫酸鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%
正五聚蛋白3(PTX3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1 M Tris-緩沖液,pH 9.5, 滅菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%
中間α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)10 x Tris-TAPS-EDTA Buffer 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品
中間α-球蛋白抑制因子H2(ITIH2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)6 x Glycerol Gel Loading Dye I (BPB) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
中間α-球蛋白抑制因子H1(ITIH1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)腺苷脫氨酶(15U/mg) 質(zhì)量規(guī)格:提取含量5%以上
CD72分子(CD72)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)阿脲 質(zhì)量規(guī)格:>98.0% (LC&T),標準品
血漿過氧化物酶(GPX3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)丁二水(>98%,USP) 質(zhì)量規(guī)格:>98%