運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針?lè)ā?/font>
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告?
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
溶血梭狀芽孢桿菌探針?lè)≒CR熒光定量試劑盒 | Clostridium haemolyticum | EY00P8830 |
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見(jiàn)”。本產(chǎn)品就是以探針?lè)晒舛?RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)的專門檢測(cè)鮑皰疹樣病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的試劑盒。
1-hour Western Kit 1小時(shí) Western 試劑盒 (可做50個(gè)反應(yīng))/300-94-甲基傘形酮-β-D-半乳糖苷肉湯/MUGal肉湯/MUGal Broth ABD-F [=4-(Aminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]
RNA Stabilization Solution(RNA穩(wěn)定處理溶液), RNA穩(wěn)定劑/保護(hù)劑/緩沖MUG瓊脂/緩沖4-甲基傘形酮葡糖苷酸瓊脂/Buffered MUG Agar Ferroceneacetic Acid
RNA Stabilization Solution(RNA穩(wěn)定處理溶液),RNA穩(wěn)定劑/保護(hù)劑/R乳糖莫能霉素葡萄糖酸瓊脂/LMG Agar (Hydrazinocarbonyl)ferrocene
DNA-AWAY,/970-66908-50Tergitol-7瓊脂/Tergitol-7 Agar Dimethyl Sulfoxide
RNA-AWAY, RNA去除液/970-66907-50標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂/標(biāo)準(zhǔn)1號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂/Standard Ⅰ Nutrient Agar 1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene
碳酸銨標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂/標(biāo)準(zhǔn)2號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂/Standard Ⅱ Nutrient Agar p-Anisaldehyde (contains Acetic Acid, H2SO4) Ethanol Solution
鹽酸西替利胰胨大豆胨固綠瓊脂/胰蛋白胨大豆快綠瓊脂/胰蛋白胨大豆固綠瓊脂/Tryptic Soy Fast Green Agar Dimethyl Sulfoxide-d6 99.9atom%D
6-氯水楊酸M-TGE肉湯/M-TGE Broth Deuterium Oxide 99.8atom%D
N,N',N'',N''',N'''',N'''''-六-O-乙?;鶜ち荕-TEC瓊脂/M-TEC Agar Sodium 3-(Trimethylsilyl)-1-propanesulfonate
藥敏紙片現(xiàn)隱肉湯/Presence Absence Broth Dimethylselenide
氨芐藥敏紙片醋酸鹽瓊脂/乙酸鹽瓊脂/Acetate Agar Tetramethyltin
異鋁水平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基/Water Plate Count Agar Zirconocene Dichloride
丁香連氮腦心浸液瓊脂/心浸液瓊脂/BHI瓊脂/BHI Agar Chirabite-AR
大孔樹(shù)脂XDA-1腦心浸液/無(wú)瓊脂腦心浸液/腦心浸液肉湯/BHI Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III)
D-桔汁瓊脂/Orange Serum Agar Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III)
溶血梭狀芽孢桿菌探針?lè)?/font>PCR熒光定量試劑盒吡哆激酶(PDXK)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)沃氏物 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CD163分子(CD163)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)DL-α-羥基戊二酸二鈉 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR
信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5B(STAT5B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)地美溴 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品1ml(500X)
生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)地美溴 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥85%,BR500 ml
癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)去氧孕烯 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
B-細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)去氧孕烯 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
胱天蛋白酶4(CASP4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)去氧孕烯 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
激活STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)地索奈德 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR