勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實驗注意事項:
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);
8.PCR擴增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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以下是勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實驗的詳細說明書:
產(chǎn)品名稱 | 勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實驗 |
英文名稱 | Rous Associated Virus(RAV)RTPCR |
編號 | EY00P1117 |
使用方法:
注:勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實驗所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
以下是勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實驗的相關(guān)產(chǎn)品,了解更多進口PCR試劑盒點擊進入。
原代成纖維細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
CD38 Others Rabbit 兔 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照)
人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WD10
HFL-I細胞,人胚肺成纖維細胞 鼠肌原細胞,C2C12細胞 T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
SK-N-SH(人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells 肺成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞 Mouse
非洲綠猴腎細胞系/IgR;VERO/IgR
大鼠星形膠質(zhì)細胞(RA)(5×105)
KM小鼠子瘤株;U14 小鼠腎小球內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1
RK1 Others Human 人 kA / RK1 人細胞裂解液 (陽性對照)
胎兒表皮角化細胞*培養(yǎng)基 100mL
新生兒表皮角化細胞*培養(yǎng)基 100mL
表皮角化細胞*培養(yǎng)基 100mL
胎兒真皮成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗培養(yǎng)基 英文名稱; 規(guī)格;
CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ) 英文名稱; Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 規(guī)格; 250g
改良Y培養(yǎng)基 英文名稱; Agar Y,Modified 規(guī)格; 250g
改良磷酸鹽緩沖液PSB 英文名稱; Phosphate Saline Buffer,Modified 規(guī)格; 250g
ITC肉湯 英文名稱; ITC Broth 規(guī)格; 250g
含225mlGN增菌液均質(zhì)袋 GN Enrichment Broth 10個/包
含100ml GN增菌液均質(zhì)袋 GN Enrichment Broth 10個/包
含225ml志賀氏菌増菌肉湯均質(zhì)袋 Shigella Enrichment Broth 10個/包
含225ml7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 7.5% NaCl Broth 10個/包
含50ml 7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 7.5% NaCl Broth 10個/包
勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實驗MLCB寒天培地 用于沙門氏菌分離培養(yǎng)用途 : 用于沙門氏菌分離培養(yǎng)。用法稱取本品 49.0g,加熱煮沸溶解于 1000ml 蒸餾水中,冷至 50-55℃時,傾入無菌平皿,備用。
GN增菌液(10ml) 主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
H-頂層培養(yǎng)基 用于鼠傷寒沙門氏桿菌回復(fù)突變試驗(Ames試驗)用于鼠傷寒沙門氏桿菌回復(fù)突變試驗(Ames試驗)產(chǎn)品用法:稱取本品11.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝試管,每支2.5ml,121℃高壓滅菌20min,備用。
低營養(yǎng)V-B培養(yǎng)基(底層) 用于鼠傷寒沙門氏桿菌回復(fù)突變試驗(Ames試驗)用途:用于鼠傷寒沙門氏桿菌回復(fù)突變試驗(Ames試驗)。用法稱取本品 50.7g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,115℃高壓滅菌 30分鐘,備用。
需要自備的器材:
1.勞斯伴隨病毒PCR試劑盒實驗儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。