產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬痘病毒探針法PCR熒光定量試劑盒 | Swine Poxvirus(SWPV) | EY00P9409 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
蜂房(標準品)n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 97%Human SLC25A20(Mitochondrial carnitine/acylcarnitine carrier protein) ELISA Kit
(標準品)n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 98%,用于蛋白分析Human AGTR1(Type-1 angiotensin II receptor) ELISA Kit
博落回(標準品)吩硫酸甲酯 98%Human SFRP4(Secreted frizzled-related protein 4) ELISA Kit
紫花杜鵑(標準品)6-磷酸葡萄糖酸三鈉鹽 99%Human CS(CitRate synthase, mitochondrial) ELISA Kit
(燈盞花)(標準品)普卡酶素 BCHuman SFTPB(Pulmonary surfactant-associated protein B) ELISA Kit
槐米(標準品)釕紅 95%Human PLA2G4A(Cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit
敗醬草(標準品)釕紅 36%,電鏡Human SFTPC(Pulmonary surfactant-associated protein C) ELISA Kit
半夏(標準品)乙酸鈉 98%Human NDUFS8(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 8, mitochondrial) ELISA Kit
豬膽粉(標準品)硫代甜菜堿 12 98%Human PRAP1(Proline-rich acidic protein 1) ELISA Kit
(標準品)十二烷基硫酸鈉 97%,電泳Human SDCCAG3(Serologically defined colon cancer antigen 3) ELISA Kit
沙苑子(標準品)十二烷基硫酸鈉 99.0%,超純級Human NDUFS7(NADH dehydrogenase [ubiquinone] iron-sulfur protein 7, mitochondrial) ELISA Kit
肉蓯蓉(管花肉蓯蓉)(標準品)硫代甜菜堿 8 98%Human CXCL14(C-X-C motif chemokine 14) ELISA Kit
黃荊子(標準品)硫代甜菜堿10 98%Human FNDC5(Fibronectin type III domain-containing protein 5) ELISA Kit
防已(標準品)二甲苯藍FF 80%Human PLK1(Serine/threonine-protein kinase PLK1) ELISA Kit
小葉榕(標準品)10.0μL微量進樣器 尖頭Human NR3C1(Glucocorticoid receptor) ELISA Kit
豬痘病毒探針法PCR熒光定量試劑盒肌球蛋白ⅠH(MYO1H)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)七氯標準溶液(100μg/ml,溶劑:甲) 質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用
分揀連接蛋白11(SNX11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)外環(huán)氧七氯標準溶液(100μg/ml,基體:石油) 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
分揀連接蛋白12(SNX12)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)外環(huán)氧七氯標準溶液(10μg/ml,基體:石油) 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
B-黑色素瘤抗原3(BAGE3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氟吡禾靈(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用
B-黑色素瘤抗原4(BAGE4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) N-異基苯(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用
多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶11(GALNT11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)吡蟲啉(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:供鑒別用
核糖核酸酶A11(RNASE11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)稻瘟靈(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用
突觸融合蛋白19(STX19)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)咪唑乙(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:鑒別豬瘤病毒探針法PCR熒光定量試劑盒