ELISA試劑盒研究干細胞生物學(xué)的性狀
ELISA試劑盒研究干細胞生物學(xué)的性狀
ELISA試劑盒均有成功別離羊水來歷干細胞的報導(dǎo),大多是運用羊水細胞貼壁的特色經(jīng)過屢次傳代的辦法取得干細胞。Tsai MS 等選用兩步培育法從孕中期羊水中成功別離出具有MSCs 特征的干細胞。隨后De Coppi 等經(jīng)過免疫磁珠辦法別離出c - Kit ( CD117) 陽性細胞,這些細胞在體外增殖敏捷,能夠構(gòu)成安穩(wěn)的細胞系,他將這些細胞命名為羊水干細胞。此外經(jīng)過克隆化培育的辦法也能夠從羊水中取得干細胞。從現(xiàn)有研討狀況看來,現(xiàn)在沒有構(gòu)成統(tǒng)一的羊水干細胞培育系統(tǒng)
ELISA試劑盒的培育現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于產(chǎn)前遺傳學(xué)確診,但其生物學(xué)性狀和在體內(nèi)的來歷仍沒有*清晰。羊水中包含了多種異質(zhì)細胞群,這些細胞首要來歷于胎兒的肌膚,胎兒的消化器官、呼吸器官和尿道,以及羊膜上皮。間充質(zhì)干細胞( MSCs) 是干細胞宗族的重要成員,來歷于發(fā)育前期的中胚層和外胚層。MSCs 開始在骨髓中發(fā)現(xiàn),因其具有多向分解潛能、造血支撐和推進干細胞植入、免疫調(diào)控和自我仿制等特色而日益遭到人們的關(guān)注。
ELISA試劑盒選用貼壁法別離取得羊水細胞,培育細胞運用低糖DMEM 培育基。搜集的20 例羊水標本中有17 例原代培育成功,并取得能夠持續(xù)傳代的安穩(wěn)細胞系。培育的羊水細胞體外增加敏捷,倍增時刻約36h。流式細胞儀檢查顯現(xiàn)細胞表達CD29、CD44、CD105 等間充質(zhì)干細胞外表象征,不表達造血干細胞外表象征CD45 和CD133。RT - PCR 的結(jié)果標明別離取得的干細胞表達Oct - 4 和Nanog 基因,且不同代的細胞間均有表達。Oct - 4 和Nanog 被認為是干細胞多能分解的首要調(diào)理因子,干細胞分解后其表達當即下調(diào)。以上結(jié)果與文獻報導(dǎo)一致,標明羊水細胞經(jīng)體外培育擴增能夠得到具有MSCs 性質(zhì)的干細胞。