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人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)elisa試劑盒操作步驟

點擊次數(shù):628 更新時間:2022-09-01

人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)elisa試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)重組蛋白

α-胞襯蛋白(SPTAN1)重組蛋白

α-乳清蛋白(αLA)重組蛋白

α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)重組蛋白

β2-微球蛋白(β2M)重組蛋白

β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)重組蛋白

β細胞素(βTC)重組蛋白

β-血小板球蛋白(βTG)重組蛋白

δ-促睡眠肽(δSIP)重組蛋白

阿黑皮素原(POMC)重組蛋白

癌胚抗原(CEA)重組蛋白

氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)重組蛋白

氨酰tRNA合成酶復合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)重組蛋白

八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)重組蛋白

白介素10(IL10)重組蛋白

白介素11(IL11)重組蛋白

白介素12A(IL12A)重組蛋白

白介素12B(IL12B)重組蛋白

白介素12受體β2(IL2Rβ2)重組蛋白

白介素13(IL13)重組蛋白

白介素15(IL15)重組蛋白

白介素16(IL16)重組蛋白

白介素17(IL17)重組蛋白

白介素18(IL18)重組蛋白


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